Tsunade, en su momento, fue considerada como la nieta de Hashirama Senju y formó parte de los Tres Legendarios Sannin de la Aldea de la Hoja junto con Jiraiya y Orochimaru durante la Gran Guerra Mundial Shinobi. Durante este conflicto, Tsunade y sus compañeros se enfrentaron a Hanzo, lo que les valió el prestigioso título.

Tras su participación en la guerra, Tsunade y sus compañeros se encontraron con los huérfanos de la Aldea de la Lluvia y decidieron entrenarlos.

En un punto indeterminado de la historia, entre la Segunda y la Tercera Guerra Mundial Shinobi, Tsunade obsequió un collar de cristal a su hermano Nawaki como regalo de cumpleaños. Tristemente, Nawaki falleció durante la guerra, y el collar regresó a manos de Tsunade. Posteriormente, Tsunade se enamoró de Dan, un hombre que compartía el deseo de convertirse en Hokage, al igual que su hermano. Tsunade le obsequió el collar de su abuelo como muestra de afecto. Sin embargo, la guerra se cobró la vida de Dan, y el collar regresó a Tsunade una vez más. Esta serie de eventos llevó a Tsunade a considerar que el collar estaba maldito, ya que quienes lo tocaban morían poco después. Además, perdió la fe en las enseñanzas de su maestro, el Tercer Hokage, tras el fracaso de la invasión a Konoha.

En su búsqueda de paz personal, Tsunade se cruzó con Orochimaru, quien le pidió un favor, aunque ella inicialmente se negó antes de conocer los detalles. La solicitud de Orochimaru era que sanara sus brazos, dañados en su intento de asesinar al Tercer Hokage. Impresionada por la revelación de Orochimaru, Tsunade estuvo dispuesta a matarlo, pero nuevamente la intervención de otros evitó una tragedia. Orochimaru le ofreció resucitar a sus seres queridos fallecidos a cambio de la curación de sus brazos, lo cual intrigó a Tsunade, quien se dio una semana para decidir.

Más adelante, Jiraiya y Naruto buscaron a Tsunade para persuadirla de convertirse en la Quinta Hokage, pero ella rechazó la oferta y se enfrentó a Naruto en un combate tras un desacuerdo sobre el respeto al título de Hokage. Tsunade ganó fácilmente, pero Naruto demostró su determinación al usar el Rasengan. Como resultado, Tsunade hizo una apuesta con Naruto: si él dominaba el Rasengan en una semana, recibiría el collar del Primer Hokage, pero si fallaba, Tsunade obtendría todo el dinero de Naruto.